První metoda pro vytváření profilu DNA byla RFLP, nebo restrikční fragment délka polymorfismus. RFLP se nepoužívá tak často, dnes, protože to vyžaduje velký vzorek DNA, - až o 25 vlasy nebo niklu velikosti místě tělesné tekutiny, - a může trvat tak dlouho, dokud jeden měsíc pro dokončení [zdroj: Baden]. To také vyžaduje zkoumání několika úseky DNA řetězce najít variace, což je časově náročné a ponechává větší prostor pro lidské chyby. Některé z kroků pro analýzu RFLP se používají také v jiných typů profilování DNA. Pro RFLP, kroky jsou:
- Samostatné bílé a červené krvinky s odstředivky.
- Výtažky z DNA jádra z bílých krvinek. To se provádí tím, koupání buněk v horké vodě, potom se přidá sůl, a uvedení směs zpět do odstředivky [zdroj: University of Arizona].
- Vyjmout řetězec DNA na fragmenty pomocí restrikční enzym.
- Place fragmentů do jednoho konce lože agarózovém gelu s elektrodami v něm. Agarózovém gelu je vyrobena z agar-agar, typ mořských řas, který se změní na želatinu, když se rozpustí ve vroucí vodě.
- Pomocí elektrického proudu třídit DNA segmenty podle délky. Tento proces se nazývá elektroforézou na agarosovém gelu. Elektroforéza se vztahuje k procesu postupu se negativně nabité molekuly prostřednictvím gelu s elektrickým proudem. Kratší úseky vzdalujete od jejich původního umístění, zatímco ty delší pobyt blíž. Segmenty sladit v rovnoběžných řadách.
- Použít list nitrocelulózy nebo nylonu se vymaž DNA. List se obarví, takže různé délky DNA pásů jsou viditelné pouhým okem. Zpracováním list s zářením, je vytvořen autoradiograf. To je obraz na rentgenový film zanechané rozpadu vzoru záření. Autoradiograf, s jeho charakteristickými tmavých paralelních pásů, je profil DNA.
PCR (polymerázová řetězová reakce), analýza je obvykle první krok při vytváření profilu DNA, které dnes. PCR se mohou replikovat malé množství DNA, čímž se vytvoří větší vzorku pro analýzu. Dělá to pomocí opakující se proces, který trvá asi pět minut. Za prvé, je DNA polymeráza tepelně stabilní - speciální enzym, který se váže na DNA a umožňuje replikaci - přidá se. Potom se vzorek DNA se zahřívá do 200 stupňů F (93 ° C) pro oddělení závitů. Potom se vzorek ochladí a znovu ohřeje. Ohřívání zdvojnásobí počet kopií. Poté, co tento proces se opakuje cca 30-krát, je dostatek DNA pro další analýzu.
PCR je prvním krokem v analýze OPO (Short tandemových opakování), které jsou velmi malé, sp
